Ферменты в медицине
1. Некоторые ферменты применяют как лечебные препараты:
- при их отсутствии или недостатке (наследственном или приобретенном), например, ферменты пищеварительного тракта (пепсин, трипсин, липаза) входят в состав лекарств, улучшающих переваривание;
- для специфического разрушения некоторых продуктов обмена (например, мочевины), тромбов, участков омертвевшей ткани на ранах.
2. Ферменты используют в клинико-диагностических лабораториях для измерения в крови концентрации глюкозы, жира, холестерина, активных форм кислорода и других веществ.
Такой анализ занимает несколько минут, при этом используется всего 10 мкл плазмы крови.
Для анализа часто используют иммобилизованные ферменты, которые искусственно связаны с нерастворимым в воде носителем, что повышает стабильность белковых катализаторов.
В клинических лабораториях применяют готовые наборы реактивов, в состав которых входят ферменты, составляющие буфер соли, а также кофакторы. При использовании иммобилизованных ферментов для определения концентрации компонента крови достаточно нанести образец сыворотки на индикаторную пластинку и сравнить интенсивность окраски с эталоном.
3. В табл. 2.4 представлены основные направления и некоторые примеры использования ферментов в медицине.
Пример 1. Во многих случаях в клинике для определения веществ в крови используют набор реактивов с несколькими ферментами.
Для количественного определения глюкозы в сыворотке крови используют 2 фермента — глюко-зооксидазу и пероксидазу:
Глюкоза окисляется под действием глюкозоок-сидазы с образованием глюконата и пероксида водорода в эквимолярных концентрациях.
Пероксид водорода легко определяется по реакции окислительной конденсации, которую ускоряет пероксидаза.
В результате сопряженного действия глюкозоок-сидазы и пероксидазы 2 неокрашенных субстрата — хлорпроизводное фенола и 4-аминофеназон — превращаются в окрашенный продукт, концентрацию которого определяют с помощью фотоэлектрокало-риметра.
4. В основе энзимодиагностики лежат следующие особенности состава и распределения ферментов в организме человека:
—Состав ферментов и их тканевое распределение у взрослого человека в основном постоянны и могут измениться при болезнях.
—Для каждой ткани (органа) характерен свой качественный и количественный состав белков, что определяет функциональные особенности каждой ткани.
—Однако метаболические пути в разных тканях очень похожи, и есть лишь несколько тканеспеци-фических ферментов (например, кислая фосфата-за предстательной железы и гистидаза печени).
—Более специфичным для тканей является соотношение разных ферментов и изоферментов.
5. Почти все ферменты организма функционируют внутриклеточно. Исключение составляют, например, ферменты пищеварительного тракта, а также ферменты свертывающей системы крови, ферменты межклеточного матрикса.
6. При повреждении тканей внутриклеточные белки появляются в сыворотке крови. Обнаружение тканес-пецифических ферментов, специфических изоформ ферментов или характерное количественное увеличение активности неспецифических ферментов в сыворотке могут помочь поставить и уточнить диагноз.
Пример 2. Анализ кинетики появления и исчезновения ферментов в сыворотке крови позволяет поставить диагноз.
Рис. 2.22 иллюстрирует, как при инфаркте (поражение сердечной мышцы) изменяется активность ферментов, которые высвобождаются в кровь из поврежденного органа.
Обратите внимание на то, что в норме активность ферментов в крови низкая. Эти данные позволяют определить, сколько дней прошло после инфаркта.
Таблица 2.4. Применение ферментов в медицине
-----------------
Основныеразделы Ферменты Примерыиспользования
Диагностика
Лактатдегидрогеназа (изоферментЛДГ-1) Инфаркт миокарда
Аспартатаминотрансфераза (ACT) Инфаркт миокарда
Аланинаминотрансфераза (АЛТ) Заболевания печени (например, инфекционный гепатит), инфаркт миокарда
КК (изоферментММ— мышечный тип изофермент MB—сердечный тип) Прогрессирующая дистрофия Инфаркт миокарда
Кислая фосфатаза (КФ) Рак предстательной железы
а-Амилаза Заболевания поджелудочной железы
Лечение Пепсин Нарушение переваривания белков в желудке, нарушение синтеза или секреции пепсина
Трипсин, химотрипсин Лечение гнойных ран
Стрептокиназа, урокиназа Предотвращение тромбообразования при пересадке органов и других операциях
Гиалуронидаза Рассасывание рубцов
Аспарагиназа Лечение некоторых злокачественных образований
Нуклеазы (ДНКаза) Вирусный конъюнктивит, ринит, гнойный бронхит
Уреаза Удаление мочевины из организма в аппаратах «искусственная почка»
1 Использование
ферментов в качестве аналитических
реактивов Глюкозооксидаза Определениеконцентрацииглюкозывкрови
Холестеролоксидаза Определение холестерина в крови
Липаза Определение триацилглицеринов в крови
Уреаза Определение мочевины в крови
Кроме подтверждения диагноза, можно наблюдать за течением болезни и эффективностью лечения.
Обратите внимание на то, что активность креатин-фосфаткиназы особенно возрастает в первые дни.
На рис. 2.22 видно, что активность (З-гидрокси-бутиратдегидрогеназы возрастает в крови медленно и сохраняется длительное время.
7. Существует связь между степенью повреждения клеток и последовательностью выхода в кровь ферментов из разных отделов клетки. При воспалительных процессах повышается проницаемость клеточных мембран и в сыворотку крови могут попадать цитоплазматические ферменты.
Некроз (омертвение) ткани сопровождается разрушением всех клеточных структур, и в сыворотке могут быть обнаружены митохондриальные, ядерные и другие ферменты.
---
Лечение болезней - www.03.at.ua